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                      ATCC細胞一旦解凍后要進行的程序說明

                      發布時間: 2024-03-21  點擊次數: 108次
                         ATCC細胞是實驗室常用的細胞模型,被廣泛用于生物醫學研究。當從液氮或超低溫冰箱中解凍這些細胞后,為了確保細胞活性和實驗的準確性,研究人員需要執行一系列關鍵步驟:
                        1.快速解凍:迅速將凍存管從冷凍環境中取出,并立即置于37℃水浴中,以最快速度解凍細胞。避免細胞在冰晶形成過程中受到損傷,防止因緩慢解凍導致的滲透壓變化損害細胞膜。
                        2.清潔消毒:在操作前確保工作臺面、設備和手部都已經進行了全消毒,以避免交叉污染。使用70%乙醇對凍存管外壁進行消毒,并在無菌條件下轉移細胞。
                        3.離心去凍存液:解凍后立即將細胞轉移到含有適量培養基的離心管中,通過輕柔離心使細胞沉淀,去除含有DMSO的凍存液,因為DMSO可能對細胞產生毒性影響。
                        4.溫和重懸:丟棄上清液后,加入預熱的適當培養基,用移液器輕柔吹打或輕輕搖晃離心管,使細胞溫和地懸浮在培養基中。
                        5.接種細胞:將重懸的細胞接種到含有適量全培養基的細胞培養瓶或皿中,輕輕晃動容器使細胞均勻分布。
                        6.環境適應:將細胞置于恒定溫度的CO2培養箱中,允許細胞適應環境,靜置數小時,待細胞貼壁后進行檢查。
                        7.次日檢查:在接種后的24小時內觀察細胞附著情況,評估存活率和生長狀態。如果有必要,更換新鮮培養基以提供充足營養,同時移除死亡細胞和其他殘留物。
                        8.常規維護:根據細胞類型和推薦的條件,定期更換培養基,監測細胞生長,并進行必要的傳代培養。
                        9.記錄與追蹤:詳細記錄解凍日期、批次、存活率、培養條件等重要信息,以便未來跟蹤實驗過程和結果。
                        10.避免污染:所有操作應在無菌條件下完成,避免細菌或真菌污染,這可能會影響實驗結果。
                        正確處理解凍后的ATCC細胞是實驗成功的關鍵。保持細胞活力的同時,避免污染和誤操作是保證數據可靠性和可重復性的重要前提。通過遵循上述步驟,研究人員可以確保其體外實驗的有效性,為取得準確和有意義的實驗結果打下堅實的基礎。
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